Внутрішній контроль якості дослідження для ПЛР у реальному часі
50
IQCA-RT50
*Всі контролі включено.
Внутрішній контроль якості дослідження (IQCA) дозволяє попередньо оцінити якість та кенцентрацію ДНк у зразках, що підлягають подальшому дослідженню ПЛР у реальному часі за допомогою наборів EntroGen.
Оптимальна якість зразку є критичною для визначення мутацій у ПЛР в реальному часі. Фіксовані у формаліні, залиті у парафін (FFPE ) тканини зазвичай використовують як джерело ДНК для ПЛР у рельному часі і забезпечують цінну інформація глибинних молекулярних процесів захворювання, специфічних для кожного пацієнта. Втім, зразки ДНК, вилучені з FFPE тканин, схильні до фрагментації, різноманітних хімічних модифікацій, або можуть містити інгібітори ПЛР, що негативно впливає на результати ПЛР дослідження. Додатково, використання оптимальної кількості ДНК для кожного qPCR дослідження є також критичним, зокрема, у випадках коли зразки пацієнта доступні у обмеженій кількості. Інструменти, основані на спектрометричних або флуориметричних вимірюваннях , надають інформацію про загальну кількість ДНК, але не про концентрацію ДНК, що може бути ампліфіковано. Інакше кажучи, такі прилади, як Nanodrop або Qubit не спроможні визначити наявність інгібіторів ДНК, або відрізнити фрагменитовану ДНК від ДНК, що може бути ампліфіковано. Отже, кількість зразку, що обирається на основі концентрації, визначеної за допомогою Nanodrop або Qubit може виявитися надлишковою або недостатньою для ПЛР реакції і негативно вплинути на якість та точність результату, та призвести дло необхідності повторного дослідження.
IQCA спеціально призначено для того, щоб зберегти час, зразки та реагенти. Від дозволяє визначити концентрацію ДНК, що підлягає ампліфікації та виявляє присутність інгібіторів ПЛР в зразках перед тим, як використати їх в дослдженні з наборами EntroGen. IQCA ампліфікує внутрішній контрольний ген і визначає кількість ДНК, виходячи з його Ct значення. IQCA потребує лише 1µL ДНК зрзку (доведеного до 10 ng/µL) для приготування реакційної суміші. Після виконання протоколу на відповідному термоциклерів для ПЛР в реальному часі, результат може бути імпортовано в автоматичну програму для визначення необхідної кількості зразку пацієнта, що містить оптимальну кількість ДНК для проведення реакції ПЛР у реальному часі.
Схематичний протокол
Після ізоляції ДНК, приготуйте реакційну суміш з використанням реагентів набору IQCA та проведіть реакцію на відповідному термоциклері. Дослідження може бути виконано лише за 1 годину 15 хвилин від початку до результату. Автоматичний аналіз доступний для аналізу результатів, ториманих на деяких приладах. Будь-ласка, зв’яжіться з нами для отримання додаткової інформації.
Обладнання та матеріали
IQCA набір потребує термоциклеру для ПЛР у реальному часі, спроможного визначати VIC флуорохром.
До складу набору включено:
2x реакційних мастер мікси
Праймер мікс для визначення внутрішнього контрольного гену
До набору не включено реагенти та матеріали для ізоляції ДНК
Реагентів IQCA набору достатньо для виконання 50 реакцій
Призначення
США: Внутрішній контроль якості дослідження для ПЛР у реальному часі (IQCA) від EntroGen призначено тільки для дослідницьких цілей (RUO). Не для застосування в діагностичних процедурах.
Європа: Внутрішній контроль якості дослідження для ПЛР у реальному часі (IQCA) від EntroGen призначено тільки для дослідницьких цілей (RUO). Не для застосування в діагностичних процедурах.
