BCR-ABL P210 (Mbcr) Однокроковий детекційний набір
Доступні продукти:
Назва/опис
К-ть тестів
Код
BCR-ABL P210 (Mbcr) Однокроковий детекційний набір
46
BCR210-QRT46
BCR-ABL P190 (mbcr) Однокроковий детекційний набір
46
BCR190-QRT46
BCR-ABL та рак
Приблизно 95% випадків хронічного мієлоїдного лейкозу (CML) та біля 35% гострого лімфобластного лейкозу (ALL) пов’язані з наявністю t(9;22)(q34;q11) хромосомних транслокацій (Філадельфійська хромосома, Ph). Це результат онкогенного злиття генів між ABL прото-онкогеном та BCR в хромосомах 9 та 22, відповідно. Точка розриву в хромосомі 22 розташована між екзонами 12 та 16 BCR гену (також відома як кластерний регіон великого розриву; Mbcr), тоді як точка розриву в хромосомі 9 зазвичай розташована між екзонами 1 та 2 ABL гену. Два найбільш поширених варіанти злиття мають назву b2a2 та b3a2, що кодують конструктивно активну хімеричну тирозин кіназу масою 210kDa (P210).
Точка розриву в хромосомі 22 виникає в першому інтроні BCR гену (також відомому як кластерний регіон малого розриву; mbcr), а точка розриву в хромосомі 9 виникає між екзоном 1 та 2 ABL гену (e1a2). Приєднання екзону 1 BCR до екзону 2 ABL призводить до утворення 190 kDa протеїну, який є конструктивно активним доменом кінази.
Інгібітори тирозин кінази, такі, як STI-571 (іматініб; IM, Gleevec®), є визнаними інгібіторами росту пухлинних клітин і сприяють зменшенню ризику виникнення «бластної кризи», фінальної фази CML, асоційованої з зниженням відповіді на терапію і скороченням періоду виживання. Повної цітогенетичної відповіді вдається досягти цілком швидко у пацієнтів з CML при лікуванні IM, тоді, як чутливий метод визначення та підрахунку злиття генів необхідний для точного прогнозу ефективності терапії.
Однокрокова кількісна RT-ПЛР
Існуючі протоколи програми «Європа проти раку» (EAC) та Національної Онкологічної Мережі (NCCN) рекомендують застосування кількісної ПЛР у реальному часі для визначення і підрахунку BCR-ABL експресії до, під час та після терапії IM для досягнення мінімальної резидуальної хвороби (MRD) у пацієнтів з CML та ALL. Цей тест розроблено у відповідності до цих протоколів.
Однокрокові детекційні набори BCR-ABL P210 (Mbcr) та P190 (mbcr) створено для високо-відновного одно-ланцюгового cDNA синтезу та подальшої ПЛР в реальному часі у єдиній пробірці. Комбінація валідованих праймерів, гідроліз зондів та hot-start ДНК полімерази забезпечують високо-специфічні та ультра-чутливі результати в єдиному кроці. Використовується порівняльний Ct метод (Pfaffl метод) для визначення цілі: пропорції референтного гену, які шикуються у відповідності до Міжнародної Шкали (МШ).
Переваги тесту
До BCR-ABL P210 (Mbcr) однокрокового детекційного набору входять реагенти для детекції та підрахунку b2a2 та b3a2 транскрипту злиття генів, а до однокрокового детекційного набору BCR-ABL P190 (mbcr) включено реагенти для детекції і підрахунку e1a2 транскриптів злиття гену, що використовують загальну РНК, ізольовану з крові або кісткового мозку. Деякі переваги використання цього набору:
Однокроковий cDNA синтез і підрахунок – немає потреби виконувати окремо процедуру синтезу cDNA та qPCR
Результати шикуються у відповідності до МШ – контроль та стандарт включено. P210 набір виконано у відповідності до WHO BCR-ABL первинних стандартів
Незначний ризик контамінайції – відсутність операцій з продуктами пост-ПЛР
Велика пропускна здатність – можна обробити до 46 зразків у одному протоколі на 96 лунках
Швидкість – результат менш ніж за 80 хв від старту ПЛР
Мультиплексність – референтні та таргетні гени досліджуються в одній і тій самій реакції
Обладнання та матеріали
Однокрокові детекційні набори BCR-ABL P210 (Mbcr) та P190 (mbcr) потребують ПЛР ампліфікатора в реальному часі, здатного визначати FAM™ та VIC® флуоромітки. Набори не включають реагенти та колонки для ізоляції загальної РНК з крові та кісткового мозку.
Ці набори містять реагенти, необхідні для синтезу cDNA та ПЛР ампліфікації/детекції, а також валідовані реакційні контролі. Колонки та реагенти для ізоляції РНК не включено.
Призначення
США:
Призначено лише для дослідницьких цілей (RUO). Не для діагностичних процедур.
Європа:
Призначено лише для дослідницьких цілей (RUO), а також для діагностики in vitro (IVD).
